Национальный производитель
иммунобиологических препаратов в России
27 сентября 2022 года, 21:39 (МСК)
RU
Национальный производитель
иммунобиологических препаратов в России

Антиген риккетсиозный Провачека для РНГА, сухой

Медицинские изделия для диагностики IN VITRO
Срок годности
5 лет.
Производитель
Филиал АО НПО "Микроген" в г. Пермь "Пермское НПО "Биомед"" Россия, 614089, Пермский край, г. Пермь, ул. Братская, д. 177
Внешний вид упаковки и препарата может отличаться от изображённого на фотографии


Инструкция по применению

Описание

Антиген риккетсиозный Провачека для реакции непрямой гемагглютинации (РНГА) представляет собой лиофилизированный полисахаридный гаптен риккетсий Провачека, вы-ращенных в желточных мешках куриных эмбрионов и очищенных методом дифференци-ального центрифугирования в сочетании с эфирной обработкой, с дальнейшим термическим экстрагированием в присутствии натрия гидроксида и последующим диализом.

Форма выпуска

Выпускается в наборе: Антиген риккетсиозный Провачека для РНГА - 10 амп. по 0,5 мл; Сыворотка Провачека для РНГА - 3 амп. по 0,1 мл

Состав

Антиген риккетсиозный Провачека для РНГА. Аморфная масса в виде порошка или «таблетки» желтовато -белого цвета

10 амп. по 0,5 мл

Сыворотка Провачека для РНГА. «Таблетка» или аморфная масса от желтоватого - белого до коричневато -розового цвета

3 амп. по 0,1 мл


Показания для применения

Предназначен для серологической диагностики эпидемического сыпного тифа и болезни Брилля в РНГА.

Режим дозирования и способ применения

Разведения всех ингредиентов реакции готовят на 0,9 % растворе натрия хлорида рН (7,0±0,2). В день постановки РНГА антиген растворяют в объеме, указанном на этикетке ампулы (10 мл). Время растворения не превышает 2 мин, растворенный препарат представляет собой прозрачную или слегка опалесцирующую жидкость.

Приготовление 1 % взвеси эритроцитов барана, сенсибилизированных антигеном.

К 4 мл растворенного антигена добавляют 0,1 мл осадка эритроцитов барана, трижды отмытых 0,9 % раствором натрия хлорида, тщательно перемешивают встряхиванием и выдерживают 1 час в термостате при температуре (37±1) ºС, повторяя встряхивание каждые 10 – 15 минут. Смесь центрифугируют 10 минут при 3000 об/мин и полностью удаляют надосадочную жидкость. К осадку добавляют 10 мл 0,9 % раствора натрия хлорида.

Подготовка исследуемой сыворотки.

1. Инактивирование сыворотки: нативную сыворотку выдерживают в водяной бане при температуре 56 ºС в течение 30 мин.

2. Адсорбция гетерогенных гемагглютининов: в центрифужную пробирку наливают 0,9 мл 0,9 % раствора натрия хлорида и 0,1 мл исследуемой сыворотки; добавляют 0,05 мл отмытого осадка эритроцитов барана; смесь выдерживают при комнатной температуре в течение 15 – 20 минут, периодически встряхивая; центрифугируют 10 минут при 3000 об/мин. Надосадочную жидкость (разведение сыворотки 1:10) используют для приготовления дальнейших разведений.

3. Приготовление начального разведения сыворотки 1:125 к 11,5 мл 0,9 % раствора натрия хлорида добавляют 1,0 мл исследуемой сыворотки, разведенной 1:10.

ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА

РНГА ставится в лунках стандартного полистеролового планшета в объеме 0,5 мл. В лунки наливают по 0,4 мл двукратно разведенной (0,9 % раствором натрия хлорида) исследуемой сыворотки от 1:125 до 1:64000. В каждую лунку добавляют по 0,1 мл 1 % взвеси эритроцитов барана, сенсибилизированных антигеном.

Реакцию сопровождают контролем:

- на отсутствие гетерогенных гемагглютининов в исследуемой сыворотке: к 0,4 мл сыворотки в разведении 1:125 добавляют 0,1 мл 1 % взвеси эритроцитов барана, не сенсибилизированных антигеном (для получения такой взвеси к 0,1 мл осадка трижды отмытых эритроцитов барана добавляют 9,9 мл 0,9 % раствора натрия хлорида);

- на отсутствие спонтанной агглютинации эритроцитов барана, сенсибилизированных антигеном: к 0,4 мл 0,9 % раствора натрия хлорида добавляют 0,1 мл 1 % взвеси эритроцитов барана, сенсибилизированных антигеном;

- на отсутствие спонтанной агглютинации эритроцитов барана, не сенсибилизированных антигеном: к 0,4 мл 0,9 % раствора натрия хлорида добавляют 0,1 мл 1 % взвеси эритроцитов барана, не сенсибилизированных антигеном;

- специфической активности антигена: содержимое одной ампулы диагностической сыворотки разводят в 12,5 мл 0,9 % раствора натрия хлорида, получая разведение 1:125; к                  0,4 мл двукратных разведений диагностической сыворотки (от 1:125 до одного-двух разведений, превышающих ее титр, указанный на этикетке ампулы), добавляют по 0,1 мл 1 % взвеси эритроцитов барана, сенсибилизированных антигеном.

Содержимое лунок перемешивают интенсивным покачиванием до получения гомогенной взвеси и оставляют на 18 часов при температуре (20±2) ºС.

РЕГИСТРАЦИЯ И УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ

Проводят визуально по наличию или отсутствию агглютинации эритроцитов.

При положительной реакции на дне лунки образуется широкий зернистый осадок из склеившихся эритроцитов в виде перевернутого зонтика.

При отрицательной реакции эритроциты оседают на дне лунки в виде маленького диска с ровными краями или кольца с гладким краем.

Результаты реакции считают достоверными при следующих условиях:

- испытуемая сыворотка не агглютинирует эритроциты барана, не сенсибилизированные антигеном;

- отсутствует спонтанная агглютинация эритроцитов барана, сенсибилизированных антигеном и не сенсибилизированных антигеном;

Диагностическая сыворотка агглютинирует эритроциты барана, сенсибилизированные антигеном, до ее титра, указанного на этикетке.

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ

При заболевании сыпным тифом РНГА становится положительной при разведении сыворотки 1:125 – 1:250 на 5 – 7 день болезни, нарастание титра до 1:1000 – 1:64000 наблюдается на второй неделе заболевания. В связи с этим рекомендуется исследовать парные сыворотки, полученные на 5 – 7 и 12 – 15 дни заболевания.

Диагностическим титром исследуемой сыворотки при однократном исследовании является положительная реакция с разведения 1:1000.

Меры предосторожности при применении

Класс потенциального риска применения набора – 2 б.

Входящие в состав набора компоненты инактивированны. Однако, исследуемые материалы, а также сточные растворы, оборудование и материалы, находящиеся с ними в контакте, представляют собой потенциально инфекционный материал, и обращаться с ним следует осторожно, соблюдать требования ГОСТ Р 52905-2007 «Лаборатории медицинские. Требования безопасности» ;

СП 1.3.3118-13 «Безопасность работы с микроорганизмами I - II групп патогенности (опасности)»:

- работать в резиновых одноразовых перчатках;

- пипетировать с помощью резиновой груши с силиконовой трубкой;

- все сточные растворы, пробы, реагенты биологического происхождения следует обрабатывать в соответствии с СП 1.3.3118-13 (Раздел «Риккетсии»)

- инструменты после работы протирать 70 % этиловым спиртом или 6 % раствором перекиси водорода.