Национальный производитель
иммунобиологических препаратов в России
02 февраля 2023 года, 13:24 (МСК)
RU
Национальный производитель
иммунобиологических препаратов в России

Диагностикум туляремийный жидкий для объемной и кровянокапельной реакции агглютинации

Медицинские изделия для диагностики IN VITRO
Срок годности
Срок годности изделия 2 года. Срок годности диагностикума после вскрытия ампулы – 2 часа. Диагностикум после разведе-ния хранению не подлежит.
Производитель
АО НПО "Микроген" Филиал в г. Омск "Омское предприятие по производству бактерийных препаратов", Россия, 644080, Омская область, г. Омск, пр-кт Мира, д. 7, тел. (3812) 65-06-22.
Внешний вид упаковки и препарата может отличаться от изображённого на фотографии


Инструкция по применению

Описание

Применяют для серодиагностики туляремии и определения специфических антител у вакцинированных против туляремии или переболевших туляремией.

Форма выпуска

Комплект 1  укомплектован принадлежностями - скарификатором ампульным.
Комплект 2. При упаковке ампул с кольцом или точкой для вскрытия скарификатор не вкладывают.

Назначение

Диагностикум туляремийный жидкий для объемной и кровянокапельной реакции агглютинации предназначен для серодиагностики туляремии и определения специфических антител у переболевших туляремией, у вакцинированных против туляремии и перед прививкой против туляремии. Изделие предназначено для диагностики ин витро. Функциональное назначение - вспомогательное средство в диагностике.

Характеристика изделия

Состав и комплектация набора

Диагностикум туляремийный жидкий для объемной и кровянокапельной реакции агглютинации

Взвесь убитых формалином туляремийных микробов вакцинного штамма Francisella tularensis 15 НИИЭГ концентрацией (25 ± 2,5) х 109 микробных клеток (м.к.) в 1 мл по стандартному образцу мутности ОСО 42-28-85 соответствующего года выпуска, эквивалентного 5 х 109 м.к. туляремийного микроба в натрия хлорида растворе 0,9 %. Консервант – формалин, 0,5 % от объема. Изделие представляет собой гомогенную взвесь серовато-белого цвета. В процессе хранения выпадает осадок, легко разбивающийся при встряхивании

комплект 1

комплект 2

10 амп.

(по 1,0 мл)

10 амп. с кольцом или точкой для вскрытия (по 1,0 мл)

Комплект 1 укомплектован принадлежностями - скарификатором ампульным.

Комплект 2. При упаковке ампул с кольцом или точкой для вскрытия скарификатор не вкладывают.

«Диагностикум туляремийный жидкий для объемной и кровянокапельной реакции агглютинации» упакован в пачку из картона вместе с инструкций по применению, принадлежностями (комплект 1). К комплекту поставки прикладывают паспорт.

Базовые варианты комплектации диагностикума рассчитаны на проведение 10 анализов, включая контрольные. Изделие не подлежит ремонту и техническому обслуживанию.

Принцип действия

Метод агглютинации основан на образовании комплекса антиген-антитело (происходит склеивание и выпадение в осадок (видимый невооруженным глазом) микробных тел при взаимодействии их со специфическими антителами – агглютининами).

Для анализа используют кровь (капля периферийной крови из пальца человека или сухая капля крови) или сыворотку крови людей, полученную стандартными лабораторными методами.

От больных или лиц с подозрением на туляремию в динамике заболевания исследуют парные сыворотки с интервалом 7-10 дней.

У вакцинированных туляремийной вакциной лиц отбирают образцы крови или сыворотки крови через 5 лет после вакцинации, а в последующем – 1 раз в 2 года для оценки состояния иммунитета.

Исследуемые образцы крови или сыворотки крови хранят в условиях, предотвращающих бактериальную контаминацию при температуре от 2 до 8 °С. Если они не могут быть исследованы в течение 72 ч, их следует заморозить и хранить при температуре от минус 18 °С до минус 20 °С. Замороженные образцы перед исследованием разморозить при комнатной температуре, повторное замораживание не допускается. Исследование образцов с выраженным гемолизом, бактериальным проростом, а также длительно хранившихся без замораживания не допускается.

Перед проведением анализа образцы крови или сыворотки крови разводят стерильным натрия хлорида раствором 0,9 % рН 7,0 ± 0,1.

Для подготовки для анализа капли крови и сухой капли крови используют стерильную воду для инъекций.

Для получения сухой капли, две капли крови, взятые из пальца, наносят на прямоугольный кусочек целлофана или пергамента размером 5 х 8 см, подсушивают при комнатной температуре или в термостате при температуре (37 – 43) °С. После подсыхания крови бумагу осторожно складывают каплями внутрь и пересылают в лабораторию. Срок хранения сухой капли крови на бумаге не более 8 сут.

Аналитические и диагностические характеристики

Чувствительность: изделие должно давать положительную объемную реакцию агглютинации с сывороткой диагностической туляремийной сухой для реакции агглютинации (РА) в разведении не менее 2/3 ее титра, реакцию агглютинации на стекле – в разведении сыворотки 1:50.

Специфичность: изделие не должно давать положительную объемную реакцию агглютинации с раствором натрия хлорида в течение 1-4 мин.

 


Меры предосторожности при работе с изделием

Потенциальный риск применения набора – класс 3 (Приказ МЗ РФ №4н от 6 июня 2012 г.).

«Диагностикум туляремийный жидкий для объемной и кровянокапельной реакции агглютинации» является безопасным средством.

Однако, исследуемые материалы, а также их растворы, оборудование и материалы, находящиеся с ним в контакте, представляют собой потенциально инфекционный материал, при работе с которым необходимо соблюдать правила техники безопасности в соответствии с:

- ГОСТ Р 52905-2007 (ИСО 15190:2003) «Лаборатории медицинские. Требования безопасности»;

- СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней»;

- СП 3.1.7.2642-10 «Профилактика туляремии. Санитарно-эпидемиологические правила»;

- МУК 4.2.2939-11 «4.2. Методы контроля. Биологические и микробиологические факторы. Порядок организации и проведения лабораторной диагностики туляремии для лабораторий территориального, регионального и федерального уровней. Методические указания";

- МУ 3.4.3008-12 "3.4. Санитарная охрана территории. Порядок эпидемиологической и лабораторной диагностики особо опасных, "новых" и "возвращающихся" инфекционных болезней. Методические указания";

- МУ 3.3.1.2161-07 «Основные требования к вакцинным штаммам туляремийного микроба. Методические указания».

Исследуемые кровь или сыворотка крови людей, оборудование и материалы, находящиеся с ними в контакте представляют собой потенциально инфекционный материал и обращаться с ними следует осторожно:

- работать в одноразовых резиновых перчатках;

- не пипетировать ртом;

- в случае пролива крови или сыворотки крови людей на рабочие поверхности, необходимо проводить дезинфекцию 6 % раствором водорода перекиси;

- все использованные материалы, а также их растворы подвергать обработке 6 % раствором водорода перекиси;

- инструменты и оборудование до и после работы протирать 70 % этиловым спиртом;

Утилизировать неиспользованные материалы следует в соответствии с требованиями СанПиН 2.1.7.2790-10 «Санитарно-эпидемиологические требования к обращению с медицинскими отходами» и МУ 287-113 "Методические указания по дезинфекции, предстерилизационной очистке и стерилизации изделий медицинского назначения".

Способ применения

Объективные результаты анализа гарантируются при выполнении следующих условий:

- хранение изделия осуществлять при температуре от 2 до 8 °С в герметично укупоренном виде;

- не использовать изделие с истекшим сроком годности;

- не использовать изделие при отсутствии на его упаковке соответствующей маркировки;

- диагностикум после вскрытия ампулы пригоден к использованию в течение 2 ч.

Оборудование и материалы

- рН-метр;

- термостат поддерживающий температуру (21 ± 1) °С;

- термостат поддерживающий температуру (37 ± 1) °С;

- холодильник бытовой (5+3) °С;

- дозаторы пипеточные со сменными наконечниками одноканальные переменного объема 500 - 10000 мкл;

- пробирки;

- агглютинационные пробирки;

- пипетки градуированные вместимостью 1,0 мл;

- штатив для пробирок;

- стекла предметные;

- палочка стеклянная;

- бумага фильтровальная;

- натрия хлорида раствор 0,9 % рН 7,0 ± 0,1;

- вода для инъекций.

Проведение исследования

Приготовление рабочего раствора диагностикума

Для приготовления рабочего раствора диагностикума используют стерильный натрия хлорида раствор 0,9 % рН 7,0 ± 0,1.

Рабочий раствор готовят непосредственно перед внесением в пробирки с разведенной исследуемой пробой крови или сыворотки крови. Диагностикум разводят 1:5 натрия хлорида раствором 0,9 %, предварительно тщательно встряхнув содержимое ампулы. Рабочий раствор должен представлять собой слегка опалесцирующую жидкость без хлопьев и посторонних частиц. Рабочий раствор хранению не подлежит.

Постановка реакции агглютинации объемным методом.

В ряд пробирок помещают по 0,5 мл крови или сыворотки крови обследуемого, разведенной стерильным натрия хлорида раствором 0,9 % в соотношении 1:12,5; 1:25; 1:50; 1:100; 1:200; 1:400 (по объему), и добавляют по 0,5 мл рабочего раствора диагностикума. Получают фактические разведения сыворотки 1:25; 1:50; 1:100; 1:200; 1:400; 1:800. В контрольную пробирку вносят 0,5 мл натрия хлорида раствора 0,9 % и 0,5 мл рабочего раствора диагностикума. Штатив с пробирками встряхивают, помещают в термостат и выдерживают 2 ч при температуре (37 ± 1) °С, а затем 24 ч при температуре (21 ± 1) °С.

Постановка кровянокапельной реакции агглютинации на стекле.

Каплю периферийной крови из пальца человека с подозрением на заболевание туляремией помещают на предметное стекло. Смешивают каплю крови на стекле с каплей стерильной воды для инъекций до наступления гемолиза эритроцитов. Рядом с этой каплей помещают каплю неразведенного диагностикума (содержимое ампулы с изделием предварительно встряхнуть). Стеклянной палочкой или краем предметного стекла смешивают обе капли. Контролем служат две смешанные капли: изделия и натрия хлорида раствора 0,9 %.

Постановка кровянокапельной реакции агглютинации с сухой каплей крови.

На сухую каплю крови наносят 1-2 капли воды для инъекций и осторожно перемешивают. После растворения каплю переносят пипеткой на предметное стекло, добавляют 1 каплю неразведенного диагностикума и перемешивают стеклянной палочкой или краем предметного стекла.

Результаты анализа регистрируют визуально.

Регистрация и учет результатов

Реакцию агглютинации объемным методом считают положительной, если наблюдается просветление жидкости и образование ясно видимого осадка, который при легком встряхивании поднимается со дна в виде хлопьев. В контрольной пробирке агглютинация должна отсутствовать.

Кровянокапельную реакцию агглютинации на стекле с сывороткой или каплей сухой крови учитывают через 1-4 мин после соединения их с диагностикумом. Положительную реакцию отмечают одним или двумя крестами в зависимости от времени появления и степени ее выраженности. Появление отчетливого агглютината через 2-3 мин – два креста, слабого агглютината через 3-4 мин – один крест. В контроле с натрия хлорида раствором 0,9 % микробная взвесь изделия должна оставаться гомогенной в течение 1-4 мин. Допускается неспецифическая агглютинация.

Примечание: Агглютинация является неспецифической, если позднее, чем через 4 мин в контроле с натрия хлорида раствором 0,9 % появляется слабый агглютинат.

За титр, подтверждающий наличие антител, при исследовании крови или сыворотки крови от больных людей в объемной реакции принимают титр 1:100, в кровянокапельной реакции на стекле – 1:50. Диагностически достоверным является 4-кратное и более увеличение титра антител. У вакцинированных и лиц, обследуемых перед вакцинацией, подтверждением наличия антител является титр не менее 1:20.

При изучении иммунологического состояния организма, привитого против туляремии, реакцию агглютинации (объемную и кровянокапельную) ставят по указанным выше схемам. Ввиду сравнительно низких титров агглютининов в объемной реакции агглютинации разведения сыворотки следует начинать с 1:10.

Условия хранения и эксплуатации

Хранение

Хранение изделия в соответствии с СП 3.3.2.3332-16 в упаковке производителя должно производиться в течение всего срока годности при температуре от 2 до 8 °С. Замораживание не допускается.

Транспортирование

Транспортирование изделия должно производиться в соответствии с СП 3.3.2.3332-16 всеми видами крытого транспорта при температуре от 2 до 8 °С. Замораживание не допускается.

Условия отпуска

Для учреждений здравоохранения.