Национальный производитель
иммунобиологических препаратов в России
29 ноября 2022 года, 10:12 (МСК)
RU
Национальный производитель
иммунобиологических препаратов в России

Системы индикаторные бумажные для идентификации микроорганизмов. Наборы № 3, 4 для санитарно-бактериологического анализа воды

Медицинские изделия для диагностики IN VITRO
Срок годности
Срок годности – 12 месяцев со дня приемки. Изделие с истекшим сроком годности использованию не подлежит.
Производитель
АО НПО "Микроген" Филиал в г. Нижний Новгород "ИмБио", Россия, 603006, Нижегородская область, г. Нижний Новгород, ул. Грузинская, д. 44, тел. (831) 434-42-77.
Внешний вид упаковки и препарата может отличаться от изображённого на фотографии


Инструкция по применению

Описание

Положительно реагирующие при использовании СИБ тест-штаммы должны  изменять цвет субстрата в растворенном виде или цвет полоски в соответствии с таблицей учета результатов исследования.

Форма выпуска

Набор реагентов «Системы индикаторные бумажные для идентификации микроорганизмов. Набор № 3 для санитарно-бактериологического анализа воды»: изделие (1 флакон (50 дисков) - СИБ с лактозой; 1 пробирка (5 полос) СИБ для определения оксидазы), инструкция по применению, паспорт (в комплекте поставки).
Набор реагентов «Системы индикаторные бумажные для идентификации микроорганизмов. Набор № 4 для санитарно-бактериологического анализа воды»: изделие (1 флакон (50 дисков) - СИБ с лактозой; 1 пакет (50 дисков) - СИБ для определения оксидазы), инструкция по применению, паспорт (в комплекте поставки).

Назначение

Изделие для диагностики ин витро предназначено для определения общих и термотолерантных колиформных бактерий при контроле качества воды по биохимической активности хромогенным методом. Набор № 3 предназначен для санитарно-бактериологического анализа воды титрационным методом, Набор № 4 - для санитарно-бактериологического анализа воды методом мембранной фильтрации.

Функциональное назначение теста, выполняемого с помощью изделия - вспомогательное средство в санитарно-бактериологическом анализе воды.

Показания к применению изделия в соответствии с его назначением. Противопоказания при применении изделия – отсутствуют.

Характеристика изделия

СОСТАВ МЕДИЦИНСКОГО ИЗДЕЛИЯ И ЕГО КОМПОНЕНТОВ

Варианты исполнения.

I. Набор реагентов «Системы индикаторные бумажные для идентификации микроорганизмов. Набор № 3 для санитарно-бактериологического анализа воды».

Состав изделия:

  1. СИБ с лактозой - 1 флакон (50 дисков).
  2. СИБ для опреде­ления оксидазы - 1 пробирка (5 полос).         

II. Набор реагентов «Системы индикаторные бумажные для идентификации микроорганизмов. Набор № 4 для санитарно-бактериологического анализа воды».

Состав изделия:

  1. СИБ с лактозой - 1 флакон (50 дисков).
  2. СИБ для опреде­ления оксидазы - 1 пакет (50 дисков).

Комплектация.      

Набор реагентов «Системы индикаторные бумажные для идентификации микроорганизмов. Набор № 3 для санитарно-бактериологического анализа воды»: изделие (1 флакон (50 дисков) - СИБ с лактозой; 1 пробирка (5 полос) СИБ для  определения оксидазы), инструкция по применению, паспорт (в комплекте поставки).

Набор реагентов «Системы индикаторные бумажные для идентификации микроорганизмов. Набор № 4 для санитарно-бактериологического анализа воды»: изделие (1 флакон (50 дисков) - СИБ с лактозой; 1 пакет (50 дисков) -  СИБ для  определения оксидазы), инструкция по применению, паспорт (в комплекте поставки).

Системы индикаторные бумажные (СИБ) для идентификации микроорганизмов представляют собой диски диаметром 9-10 мм (СИБ-диски с лактозой) и 35-36 мм (СИБ-диски для определения оксидазы) или полоски шириной 7-8 мм, длиной 70-80 мм  из бумаги хроматографической, содержащие определенные количества реагентов (субстратов в сочетании с индикатором), стабилизированные поливиниловым спиртом. Гигроскопичны, при хранении на свету возможно изменение цвета.

Таблица 1

Описание основных функциональных элементов изделия

Наименование СИБ

Основной

реагент СИБ

Индикатор

Стабилизатор

Внешний вид                   СИБ в сухом виде

СИБ с лактозой

D(+) лактозы моногидрат

Феноловый красный

Спирт поливиниловый

Диски от оранжевого до красного цвета

СИБ для определения оксидазы

N,N-диметил-п-фенилендиамин сернокислый,

a-нафтол

Спирт поливиниловый

 

Полоски от серовато-сиреневого до темно-фиолетового цвета

ПРИНЦИП АНАЛИТИЧЕСКОГО МЕТОДА И ПРИНЦИП ДЕЙСТВИЯ

Принцип действия основан на определении общих и термотолерантных колиформных бактерий по их способности к образованию кислоты и газа при ферментации лактозы  и отсутствию оксидазной активности.

Характер ферментации лактозы оценивают по газообразованию и  изменению окраски среды вследствие образования органических кислот (уменьшение рН), вызывающих изменение окраски индикатора.

Определение оксидазной активности. В присутствии оксидаз бактерий происходит перенос электронов к N,N-диметил-п-фенилендиаминy, из него образуется индофенол – вещество синего цвета.

ОСНОВНЫЕ ПОТРЕБИТЕЛЬСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ

 Набор реагентов «Системы индикаторные бумажные для идентификации микроорганизмов. Наборы № 3, 4 для санитарно-бактериологического анализа воды»  рассчитаны на проведение 50 анализов (для каждого варианта исполнения). Изделие  предназначено для лабораторной диагностики, для однократного применения по назначению. Вид аналита – качественный. Не требует ремонта и технического обслуживания.

Пользователями изделия могут быть специалисты бактериологических лабораторий лечебно-профилактических учреждений  или учреждений, осуществляющих санитарно-эпидемиологический надзор, с высшим и средним специальным образованием, прошедшие специальную подготовку и допущенные к работе с патогенными микроорганизмами в соответствии с  СП 1.3.2322-08.

АНАЛИТИЧЕСКИЕ  ХАРАКТЕРИСТИКИ

Время срабатывания:

 - СИБ для определения оксидазы от 30 до 60 с;

 - СИБ с лактозой от 5 до 18 ч

Чувствительность: При суспендировании или нанесении на полоску (диск) полной бактериологической петли культуры положительно реагирующих тест-штаммов бактерий семейства Enterobacteriaceae должен изменяться цвет раствора (после погружения СИБ-диска с лактозой) или цвет полоски (диска) (после нанесения культуры тест-штамма) и выделяться газ спустя время срабатывания в соответствии с таблицей  учета результатов испытаний и биохимическими характеристиками тест – штаммов.

Специфичность (правильность дифференциации тест-штаммов бактерий семейства Enterobacteriaceae от тест-штаммов бактерий других групп): Тест-штаммы бактерий семейства Enterobacteriaceae и бактерий других групп должны изменять цвет раствора (после погружения СИБ-диска с лактозой) или цвет полоски (диска) (после нанесения культуры тест-штамма) и выделять газ спустя время срабатывания в соответствии с таблицей  учета результатов испытаний и биохимическими характеристиками тест – штаммов.

Меры предосторожности при работе с изделием

Потенциальный риск применения набора – класс 2б.

Изделие Набор реагентов «Системы индикаторные бумажные для идентификации микроорганизмов. Наборы № 3, 4 для санитарно-бактериологического анализа воды» является безопасным Изделие не приносит вреда окружающей природной среде и здоровью человека при транспортировании, хранении, применении. Утилизация изделий, не прошедших контроль (забракованные изделия), а также с истекшим сроком годности и неиспользованных изделий, не требует специальных мер безопасности, которые уничтожаются в соответствии с требованиями СанПиН 2.1.7.2790-10 «Санитарно-эпидемиологические требования к обращению с медицинскими отходами».

Однако, исследуемые материалы, а также их растворы, оборудование и материалы, находящиеся с ним в контакте, представляют собой потенциально инфекционный материал, при работе с которым необходимо соблюдать правила техники безопасности в соответствии с:

- ГОСТ Р 52905-2007 (ИСО 15190:2003) «Лаборатории медицинские. Требования безопасности»;

- СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней» (для бактериологических лабораторий учреждений, осуществляющих государственный санитарно-эпидемиологический надзор и лечебно-профилактических учреждений);

- СП 1.3.2518-09 «Дополнения и изменения № 1 к СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III - IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней;

- СП 1.3.2885-11 «Дополнения и изменения № 2 к СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III - IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней».

Исследуемые образцы, оборудование и материалы, находящиеся с ними в контакте представляют собой потенциально инфекционный материал, и обращаться с ними следует осторожно:

- работать в боксированных помещениях для проведения микробиологических исследований с применением индивидуальных средств защиты (защитной одежды и одноразовых резиновых перчаток);

- не пипетировать ртом;

- в случае пролива образцов и рабочих растворов на рабочие поверхности, необходимо проводить дезинфекционную обработку с использованием дезинфицирующих средств, эффективность которых подтверждена в отношении используемого в работе возбудителя;

- инструменты и оборудование (до и после работы) подвергать обработке с использованием дезинфицирующих средств, эффективность которых подтверждена в отношении используемого в работе возбудителя;

- утилизировать все использованные материалы, а также их растворы, исследуемые образцы и их растворы в соответствии с действующими санитарными правилами работы с патогенными микроорганизмами.

Способ применения

ПЕРЕЧЕНЬ РИСКОВ, ИДЕНТИФИЦИРОВАННЫХ В ПРОЦЕССЕ АНАЛИЗА РИСКОВ И МЕРЫ ПО СНИЖЕНИЮ РИСКОВ ПРИ ПРИМЕНЕНИИ ИЗДЕЛИЯ

Объективные результаты анализа гарантируются при выполнении следующих условий:

- для получения четких результатов необходимо соблюдение температурного режима термостата (37±1) °С и (44±1) °С, рН применяемых питательных сред и режима обработки посуды.

- соблюдения условий хранения (при температуре от 2 до 25 оС в герметично укупоренном виде) и транспортирования, изделия, транспортированные и хранившиеся с нарушением температурного режима, применению не подлежат;

- не использовать изделие с истекшим сроком годности;

- не использовать изделие при отсутствии на его упаковке соответствующей маркировки, нарушении целостности упаковки компонентов и компоненты от разных серий изделия;

- компоненты изделия после вскрытия флакона (пробирки, пакета) пригодны к использованию в течение срока годности, при условии хранения в закрытых пробкой флаконах (пробирках, пакетах) сухом и защищенном от света месте, при температуре от 2 до 25 °С.

- исследования проводят с чистой культурой, а также с отдельными колониями с
питательного агара для выделения и культивирования энтеробактерий (среда Эндо) или с мембранного фильтра, помещенного после фильтрации на среду Эндо;

- погружение дисков с лактозой в пробирки производят обожженным пинцетом;

- критерием правильности учета реакции должны быть четкие различия в окраске по
сравнению с контролем.

ОБОРУДОВАНИЕ И РЕАГЕНТЫ, НЕОБХОДИМЫЕ ПРИ РАБОТЕ С ИЗДЕЛИЕМ

  • Термостат, обеспечивающий температуру (37±1) °С;
  • Термостат, обеспечивающий температуру (44±1) °С;
  • Бокс микробиологической безопасности II класса;
  • Автоклав;
  • Пробирки стеклянные;
  • Чашки Петри;
  • Пинцеты;
  • Петля бактериологическая № 3;
  • Палочка стеклянная;
  • Вата медицинская гигроскопическая;
  • Вода дистиллированная;
  • Питательный бульон сухой;
  • Вода дистиллированная стерильная.

АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ

Исследования проводят с чистой культурой, а также с отдельными колониями с питательного агара для выделения и культивирования энтеробактерий (среда Эндо) или   с мембранного фильтра, помещенного после фильтрации на среду Эндо, полученными из материала для санитарных и бактериологических исследований водных объектов, в том числе холодной и горячей воды централизованного водоснабжения, воды нецентрализованного водоснабжения, воды, расфасованная в емкости, воды бассейнов и др. Для отбора проб используют чистую стерильную посуду, не содержащую следов дезинфицирующих растворов. Стерилизацию посуды и других средств забора материала проводят автоклавированием, сухим жаром или кипячением в 2%-м растворе пищевой соды.

Требования к отбору, транспортировке и хранению до исследования анализируемых образцов в соответствии с ГОСТ 31942-2012 (ISO 19458:2006) «Вода. Отбор проб для микробиологического анализа» и в соответствии с МУК 4.2.1018-01 «Санитарно-микробиологический анализ питьевой воды».

ПРОВЕДЕНИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Для получения культур и проведения исследования используют питательные среды в соответствии с МУК 4.2.1018-01.

Питательный бульон рН (7,3±0,2) готовят из сухой питательной среды промышленного производства (ГОСТ 20730-75 или ТУ 9398-021-78095326-2006 или аналогичного) по способу, указанному производителем, после растворения ингредиентов устанавливают рН (7,3±0,2), разливают по 1 мл в пробирки, стерилизуют автоклавированием при (121+1) оС в течение 15 мин.

Определение оксидазной активности. Проводят штрихом или на мембранном фильтре:

а) штрихом: культуру, выросшую на поверхности среды Эндо в течение 18-24 ч при температуре (37±1) °С, растирают платиновой петлей или стеклянной палочкой на полоске (диске) СИБ для определения оксидазы, помещенной в чашку Петри и предварительно смоченной стерильной дистиллированной водой. На одной полоске (диске) можно исследовать 10-14 культур (не более). Время проявления положительной реакции – 30 – 60 с. Если при исследовании колоний темно-красного цвета получен недостаточно четкий результат, культуру пересевают со среды Эндо на питательный агар, инкубируют при температуре (37±1) °С в течении 3-6 ч и пробу повторяют.

б) на мембранном фильтре: мембранный фильтр после фильтрации с выросшими на нем колониями после инкубации на среде Эндо в течение 22-26 ч при температуре (37±1) °С помещают пинцетом, не переворачивая, на диск СИБ для определения оксидазы, помещенный в чашку Петри и предварительно смоченный стерильной дистиллированной водой. Время проявления положительной реакции может варьировать в зависимости от марки используемого мембранного фильтра. Не позднее 5 мин после появления признаков положительной реакции, мембранный фильтр переносят обратно на среду Эндо. Результат учитывают после четкого проявления реакции.

Оксидазоположительные колонии из дальнейших исследований исключают.

Определение характера ферментации лактозы.

В пробирки с 1 мл питательного бульона рН (7,3±0,2) суспендируют полную петлю культуры отобранных оксидазоотрицательных колоний, затем погружают в пробирку диск СИБ с лактозой. Среда в пробирках в результате быстрой диффузии в нее индикатора становится красной. Для учета газообразования в пробирки помещают небольшой комочек стерильной гигроскопической ваты. В качестве контроля служат СИБ-диски с лактозой, погруженные в пробирки 1 мл воды пептонной 0,5 % или питательного бульона рН (7,3±0,2).

а) для подтверждения наличия общих колиформных бактерий посевы инкубируют при температуре (37±1) °С. При наличии четой положительной реакции результат может быть учтен через 4-6 ч. Если реакция отрицательная, пробирки с посевами просматривают через 24 ч. Окончательный учет отрицательного результата через 48 ч.

б) для подтверждения наличия термотолерантных колиформных бактерий посев осуществляют в   пробирки с 1 мл питательного бульона рН (7,3±0,2) с СИБ с лактозой, предварительно подогретую до температуры (44±1) °С, затем инкубируют при температуре (44±1) °С. При наличии четой положительной реакции результат может быть учтен через 4-6 ч. Окончательный учет отрицательного результата через 24 ч.

РЕГИСТРАЦИЯ И УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ

Регистрацию результатов анализа проводят визуально.

Учет результатов производят в соответствии с таблицей 2 и МУК 4.2.1018-01.                                     

Таблица 2

Учет результатов испытаний

Тесты

Цвет раствора после погружения СИБ-диска

Время срабатывания

Результат испытаний

положительный

отрицательный

Оксидазная активность

(СИБ для определения оксидазы)

-

 

30-60 с

синий

(колонии приобретают синий ободок или синеют полностью)

окрашивание

отсутствует

Ферментация лактозы

(СИБ с лактозой)

 

 

красный

5-18 ч

цвет среды желтый или оранжевый, наличие газа

цвет среды красный, газ отсутствует или цвет среды желтый или оранжевый, газ отсутствует


Интерпретацию результатов и вывод о наличии в образце общих и термотолерантных колиформных бактерий проводят в соответствии с МУК 4.2.1018-01.

Условия хранения и эксплуатации

Транспортирование должно проводиться всеми видами крытого транспорта при температуре   от 2 до 25 °С. Допускается транспортирование при температуре от минус 20 до 2 °С не более 14 суток.

Хранение при температуре от 2 до 25 °С в защищенном от света месте.

Набор № 3. При вскрытии флакона (пробирки) в асептических условиях компоненты набора подлежат хранению до истечения срока годности в герметично закрытом(ой) флаконе (пробирке) при температуре от 2 до 25 оС в защищенном от света месте.

Набор № 4. При вскрытии флакона (пакета) в асептических условиях компоненты набора подлежат хранению до истечения срока годности в герметично закрытых флаконах при температуре от 2 до 25 оС в защищенном от света месте.