Набор реагентов предназначен для накопления холерного вибриона. Изделие для диагностики ин витро. Функциональное назначение - вспомогательное средство в диагностике.
Принцип метода
Принцип метода - визуальное обнаружение бактерий, выросших на питательной
среде при посеве исследуемых образцов.
Состав набора
Набор реагентов представляет собой смесь сухих компонентов.
Состав (г/л):
- пептон сухой ферментативный для бактериологических целей - 149,4
- натрия хлорид - 66,2
- калий азотнокислый - 1,7
- сода кальцинированная - 18,7
- натрий сернистокислый - 4,94
Выпускается в полиэтиленовых банках по 150, 200, 250 г, по 200 г в пакете из трехслойной ламинированной бумаги с инструкцией по применению, паспорт (в комплекте поставки). Ремонту и обслуживанию не подлежит.
Набор реагентов должен обеспечивать рост тест-штаммов Vibrio cholerae cholerae 01 группы P-1 (145), Vibrio cholerae eltor 01 группы M-878 (890), Vibrio cholerae non 01 P-9741 при посеве по ОД мл взвеси из разведения 10'7 (10 КОЕ) через 6 ч инкубации при температуре (37±1) °С.
Потенциальный риск применения изделия - класс 26.
При работе необходимо соблюдать правила техники безопасности в соответствии с ГОСТ Р 52905-2007 «Лаборатории медицинские. Требования безопасности».
Работу со штаммами V.cholerae cholerae 01 группы Р-1 (145), V cholerae eltor 01 группы М-878 (890), проводят в соответствии с СП 1.3.3118-13 «Безопасность работы с микроорганизмами I-II групп патогенности (опасности)», со штаммом V. cholerae поп 01 Р-9741 в соответствии с СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней»; СП 1.3.2518- 09 «Дополнения и изменения № 1 к СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III - IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней; СП 1.3.2885-11 «Дополнения и изменения № 2 к СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III - IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней».
Необходимо соблюдение «Правил устройства, техники безопасности производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения» (Москва, 1981 г.).
Утилизация изделий, пришедших в негодность, с истекшим сроком годности и изделий после контакта с биологическими образцами осуществляется в соответствии с требованиями СанПиН 2.1.7.2790-10 «Санитарно-эпидемиологические требования к обращению с медицинскими отходами».
Объекты исследований в санитарной и клинической микробиологии.
Приготовление рабочего раствора реагента (пептонной воды)
240,94 г набора реагентов размешивают в 1 л дистиллированной воды, доводят до кипения, кипятят в течение 2 мин, фильтруют через ватный фильтр, затем разводят в 10 раз дистиллированной водой, доводя тем самым основной раствор пептона до концентрации 1 % в пересчете на пептон, разливают по 100 мл во флаконы, закрывают ватно-марлевыми пробками и стерилизуют автоклавированием в течение 30 мин при температуре (121±2) °С.
Готовую среду можно хранить в течение 10-14 сут при условии хранения ее при температуре от 2 до 8 °С.
6.2. Посев исследуемого материала
Посев исследуемого материала проводить согласно Методических указаний Роспотребнадзора 3.3.2.2124-06. «Контроль диагностических питательных сред по биологическим показателям для возбудителей чумы, холеры, сибирской язвы, туляремии, бруцеллеза, легионеллеза» М., 2007г.
По 0,1 мл микробной взвеси каждого тест-штамма Vibrio cholerae cholerae 01 группы P-1 (145), Vibrio cholerae eltor 01 группы M-878 (890), Vibrio cholerae non 01 P- 9741, содержащей no 10 КОЕ (разведение 10'7) засевают в 3 флакона со 100 мл пептонной воды. Через 6 ч инкубации при температуре (37±1)°С из каждого флакона бактериологической петлей диаметром 5 мм высевают культуру на 3 чашки Петри с заранее отконтролированным щелочным агаром. Выращивание производят 12-18 ч при температуре (37±1) °С.
Основной пептон считают пригодным, если на всех засеянных чашках Петри со щелочным агаром вырастает не менее 1 колонии каждого тест-штамма.
В качестве контроля используют заранее отконтролированную пептонную воду.
Регистрацию результатов анализа проводят визуально, по наличию роста колоний.
Учет результатов производят согласно Методическим указаниям Роспотребнадзора 3.3.2.2124-06. «Контроль диагностических питательных сред по биологическим показателям для возбудителей чумы, холеры, сибирской язвы, туляремии, бруцеллеза, легионеллеза» М„ 2007 г.
Набор реагентов «Пептон основной сухой» хранят в герметично закрытой упаковке в сухом месте при температуре от 2 до 25 °С.
Набор реагентов транспортируют при температуре от 2 до 25 °С всеми видами крытого транспорта.
Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение настоящей Инструкции по применению.
