Питательная среда для определения чувствительности микробов к антибиотикам (среда АГВ)

Изделие для диагностики in vitro Питательная среда для определения чувствительно­сти микробов к антибиотикам (среда АГВ) предназначена для определения чувствительно­сти микроорганизмов к антибиотикам.

Функциональное назначение - вспомогательное средство в диагностике

Показания к применению изделия в соответствии с его назначением. Противопоказания при применении изделия согласно инструкции - отсутствуют.

Питательная среда представляет собой смесь сухих компонентов, мелкодисперсный порошок желтого цвета, гигроскопичный, светочувствительный.

Состав (г/л):

основа питательная для АГВ сухая - 41,0
крахмал растворимый - 0,5
динатрия фосфат обезвоженный - 3,5

Анализ осуществляется микробиологическим методом.

Принцип метода - визуальное обнаружение зон угнетения роста микроорганизмов, выросших на питательной среде АГВ, при посеве исследуемых образцов с наложением на поверхность среды дисков с антибиотиками.

Основные потребительские характеристики.

От 150-250 г в банках полимерных с винтовой горловиной в комплекте с крышкой в сборе с вкладышем с инструкцией по применению, паспорт (в комплекте поставки).

Для проведения 1000 исследований необходимо 1,2 кг сухой питательной среды.

Целевой аналит - чувствительные к антибиотикам бактерии. Тип аналита - каче­ственный.

Питательная среда после приготовления в соответствии с настоящей инструкцией предназначена для однократного применения по назначению для лабораторной диагностики, подлежит стерилизации в процессе приготовления перед использованием.

Ремонту и обслуживанию не подлежит. Монтаж, наладка, калибровка и прочие опера­ции, необходимые для ввода МИ в эксплуатацию и его правильной эксплуатации не требу­ются.

Пользователями изделия могут быть медицинские специалисты лабораторий клиниче­ской микробиологии (бактериологии) с высшим и средним специальным образованием, прошедшие специальную подготовку и допущенные к работе с патогенными микроорганиз­мами в соответствии с СП 1.3.2322-08.

Питательная среда должна обеспечивать на всех засеянных чашках равномерный рост тест-штаммов Escherichia coli АТСС 25922, Staphylococcus aureus АТСС 25923, Pseudomonas aeruginosa АТСС 27853 в виде газона с четкими зонами угнетения роста культуры соответ­ствующего диаметра (см. таблицу 2) вокруг индикаторных дисков дисков при посеве по 2 мл взвеси каждого тест-штамма из разведения 10'¹ через 18-20 ч инкубации при температуре (37±1) °С.

Класс потенциального риска применения - 2а.

Изделие не приносит вреда окружающей природной среде и здоровью человека при транспортировании, хранении, применении.

Утилизация изделий, пришедших в негодность и с истекшим сроком годности в соот­ветствии с требованиями СанПиН 2.1.7.2790-10 «Санитарно-эпидемиологические требования к обращению с медицинскими отходами» как эпидемиологически безопасных отходов Клас­са А. Изделия после контакта с биологическими образцами утилизируют в соответствии СанПиН 2.1.7.2790-10 как эпидемиологически опасные отходы класса Б.

При работе с исследуемыми образцами необходимо соблюдать правила техники без­опасности в соответствии:

- ГОСТ Р 52905-2007 (ИСО 15190:2003) «Лаборатории медицинские. Требования без­опасности»;

- СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней»;

- СП 1.3.2518-09 «Дополнения и изменения № 1 к СП 1.3.2322-08 «Безопасность рабо­ты с микроорганизмами III - IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитар­ных болезней;

-    СП 1.3.2885-11 «Дополнения и изменения № 2 к СП 1.3.2322-08 «Безопасность рабо­ты с микроорганизмами III - IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитар­ных болезней».

Исследуемые образцы, оборудование и материалы, находящиеся в контакте с образца­ми представляют собой потенциально инфекционный материал и обращаться с ним следует осторожно:

- работать с применением индивидуальных средств защиты (защитной одежды, одноразовых резиновых перчаток);

-    не пипетировать ртом;

- в случае загрязнения материалами, которые могут содержать патогенные микроорганиз­мы рабочих поверхностей, необходимо проводить дезинфекцию 70 % этиловым спиртом или другими разрешенными к применению в Российской Федерации дезинфицирующими средствами, эффективность которых в отношении соответствующих микроорганизмов под­тверждена;

- руки персонала в перчатках после работы, оборудование, находившееся в контакте с биологическими образцами и реагентами, после работы следует обработать 70 % этиловым спиртом или другими разрешенными к применению в Российской Федерации дезинфициру­ющими средствами, эффективность которых в отношении грамотрицательных микроорга­низмов подтверждена;

- все сточные растворы, как потенциально инфицированный материал, перед утилизацией следует обеззараживать кипячением в емкости в течение 30 мин, или 6 % раствором переки­си водорода или автоклавированием при (121±1) °С в течение 30 мин.

Тип анализируемого образца - суспензия микроорганизмов (бактерий) выделенных из исследуемых образцов.

Все работы по взятию, транспортированию и подготовке проб клинического материала осуществляют в строгом соответствии с требованиями СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III - IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных бо­лезней», МУ 4.2.2039-05 «Методы контроля. Биологические и микробиологические факторы Техника сбора и транспортирования биоматериалов в микробиологические лаборатории. Ме­тодические указания».

Для получения достоверных результатов рекомендуется исследовать материал для выде­ления микроорганизмов непосредственно же после забора.

Приготовление и стандартизация бактериальной суспензии, подготовку инокулюма про­изводить в соответствии с МУК 4.2.1890-04 «Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам».

Все исследуемые образцы должны быть промаркированы (идентифицированы).

Меры по снижению рисков при применении изделия.

Объективные результаты анализа гарантируются при выполнении следующих условий:

• строгое соблюдение настоящей инструкции по применению;
• соблюдение правил асептики при работе;
• соблюдение температурного режима термостата и режима обработки используемой посуды;
• соблюдение условий хранения и транспортирования (изделия, транспортированные и хранившиеся с нарушением температурного режима, а также с нарушенной при транспорти­ровании и хранении упаковкой, применению не подлежат);
• строгое соблюдение правил хранения и использования коммерческих дисков с анти­биотиками для предотвращения снижения содержания в них антибиотиков (прежде всего в результате увлажнения);
• не использовать изделие при отсутствии на его упаковке соответствующей маркиров­ки.

Подготовка питательной среды для использования.

45 г сухой питательной среды размешивают в 1 л дистиллированной воды, кипятят 3 мин до полного расплавления агара, фильтруют через ватный фильтр (вата медицинская гигроскопическая), стерилизуют автоклавированием в течение 15 мин при температуре (121±2) °С. Среду после стерилизации разливают по 20 мл в стерильные чашки Петри слоем толщиной 4 мм (на чашку диаметром 100 мм требуется 25 мл, на чашку диаметром 90 мм - 20 мл). Чашки оставляют при комнатной температуре для застывания, после чего открытые чашки со средой подсушивают в течение 50-60 мин при температуре (37±1) °С, соблюдая правила асептики. Приготовленные указанным образом чашки Петри предпочтительнее ис­пользовать немедленно. Допускается хранение в запаянных полиэтиленовых пакетах в холо­дильнике при 4-8 °С в течение 7 суток.

Проведение анализа.

Проведение анализа в соответствии с МУК 4.2.1890-04.

Регистрацию результатов анализа проводят через 18-20 часов инкубации при тем­пературе (37+1) °С визуально. Чашки Петри с образцами, помещают вверх дном на темную матовую поверхность, чтобы свет настольной лампы падал под углом 45 °С (учет в отражен­ном свете).

Линейкой или штангенциркулем измеряют диаметр зон задержки роста культур вокруг дисков с антибиотиками, включая диаметр самих дисков, с точностью до 1 мм и определяют среднее значение для трех измерений на всех чашках Петри.

Интерпретация результатов оценки антибиотикочувствительности заключается в отне­сении исследуемого микроорганизма к одной из трех категорий: чувствительный, промежу­точный, устойчивый в соответствии с МУК 4.2.1890-04.

Транспортирование всеми видами крытого транспорта при температуре от 2 до 25 °С.

Хранение в герметично закрытой упаковке в сухом, защищенном от света месте при температуре от 2 до 25 °С.

Хранение после вскрытия упаковки в сухом, защищенном от света месте при темпера­туре от 2 до 25 °С в герметично закрытом виде.

Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение настоящей ин­струкции по применению.