Характеристика набора
Принцип метода.
Принцип метода - визуальное обнаружение бактерий, выросших на питательной среде при посеве исследуемых образцов.
Состав.
Набор реагентов «Питательная среда для выделения шигелл и сальмонелл сухая (Бактоагар Плоскирева)» представляет собой смесь сухих компонентов из расчета г/л:
Панкреатический гидролизат кильки - 14,5;
Натрия хлорид -3,0;
Экстракт кормовых дрожжей -0,2;
Желчь очищенная сухая -3,5; Натрий серноватистокислый безводный -5,0;
Натрий гидроцитрат (двузамещенный) -8,5;
Динатрия фосфат обезвоженный -2,1;
Агар микробиологический - 8,0±1,0;
Йод - 0,075;
Сахар молочный -7,5;
Соль Мора -0,575;
Нейтральный красный - 0,05;
Бриллиантовый зеленый - 0,0002;
Сода кальцинированная -2,2
Выпускается в полиэтиленовых банках по 150, 200, 250 г или по 200 г в пакетах с инструкцией по применению, паспорт (в комплекте поставки). Ремонту и обслуживанию не подлежит.
Специфическая активность (показатели чувствительности, скорости роста и стабильности основных биологических свойств микроорганизмов). Питательная среда должна обеспечивать на всех засеянных чашках Петри через 18-20 ч инкубации при температуре (37±1) °С рост тест-штаммов Salmonella typhi Н-901 ГДР/ГИСК, Salmonella paratyphi А 225, Shigella flexneri la 8516, Shigella sonnei «S form», Escherichia coli 3912/41 (055.K59) при посеве по 0,1 мл микробной взвеси культуры каждого тест-штамма из разведения 10"6, разбавленного стерильным 0,9 % раствором натрия хлорида, в соотношении 1:1 (условно разведение 10'7) (для E.coli 3912 /41 (055: К59) из разведения 10‘6).
Колонии S. typhi Н-901 ГДР/ГИСК, S.paratyphi А 225, S.flexneri la 8516 бесцветные, нежные, гладкие, круглые диаметром 1,0-2,0 мм.
Колонии S.sonnei «S form» бесцветные или слегка розового цвета, нежные, гладкие, круглые диаметром 1,0-2,0 мм.
Колонии E.coli 3912/41 (055:К59) круглые, выпуклые, гладкие, малинового цвета, диаметром 1,5-2,5 мм.
Дифференцирующие свойства среды. Питательная среда должна обеспечивать четкую дифференциацию сальмонелл и шигелл от E.coli 3912/41 (055:К59) на всех засеянных чашках при посеве 0,1 мл микробной смеси каждого из тест-штаммов S.typhi Н-901 ГДР/ГИСК, S.paratyphi А 225, S.flexneri la 8516, S.sonnei «S form» из разведения 10-6
с тест-штаммом E.coli 3912/41 (055:К59) из разведения 10“5 (в соотношении 1:1) через 18-20 ч инкубации при температуре (37+1) °С.
Показатель ингибиции. Питательная среда должна полностью подавлять рост тест-штамма Staphylococcus aureus Wood-46 на всех засеянных чашках при посеве по 0,1 мл микробной взвеси из разведения 10-1 через 18-20 ч инкубации при температуре (37+1) °С. Рост тест-штамма E.coli 3912/41 (055.К59) на среде должен подавляться не менее, чем в 1,5-2,0 раза по отношению к числу колоний на питательном агаре, при посеве по 0,1 мл микробной взвеси из разведения 10 _6.
Меры предосторожности
Потенциальный риск применения изделия - класс 1.
При работе необходимо соблюдать правила техники безопасности в соответствии с ГОСТ Р 52905-2007 «Лаборатории медицинские. Требования безопасности», СП 1.3.2322- OS «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней»; СП 1.3.2518-09 «Дополнения и изменения № 1 к СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III - IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней; СП 1.3.2885-11 «Дополнения и изменения № 2 к СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III - IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней».
Соблюдение «Правил устройства, техники безопасности производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения» (Москва, 1981 г.).
Утилизация изделий, пришедших в негодность, с истекшим сроком годности и изделий после контакта с биологическими образцами осуществляется в соответствии с требованиями СанПиН 2.1.7.2790-10 «Санитарно-эпидемиологические требования к обращению с медицинскими отходами».
Проведение анализа
Подготовка питательной среды для использования.
Питательную среду, в количестве, указанном на этикетке, размешивают в 1 л дистиллированной воды, кипятить 2 мин, периодически перемешивая до полного расплавления агара. Среду охладить до температуры 40-45 °С, разлить в чашки Петри слоем 5-6 мм и подсушить с открытыми крышками в течении 1,5 ч при температуре 18-25 °С. Готовая среда в чашках - прозрачная коричневато-красного цвета.
Готовую среду можно использовать в течение 7 суток при условии хранения при температуре от 2 до 8 °С в защищенном от света месте.
Посев исследуемого материала проводят в соответствии с «Методическими указаниями по микробиологической диагностике заболеваний, вызываемых энтеробактериями» (М.,1984 г.).
