Набор реагентов «Питательная среда с эозин-метиленовым синим сухая (среда Левина)» предназначен для выделения энтеробактерий из исследуемого материала и их дифференциации по признаку ферментации лактозы, выделение коагулазоположительных стафилококков при обследовании декретированных групп. Изделие для диагностики ин витро. Функциональное назначение - вспомогательное средство в диагностике.
Принцип метода.
Принцип метода - визуальное обнаружение энтеробактерий, выросших на питательной среде Левина при посеве исследуемых образцов.
Состав набора.
Набор реагентов «Питательная среда с эозин-метиленовым синим сухая (среда Левина)» представляет собой смесь сухих компонентов из расчета г/л:
Питательный агар сухой - 36,28
Сахар молочный - 12,95
Эозин-Н - 0,63
Метиловый голубой - 0,076
Сода кальцинированная - 0,064
Набор реагентов «Питательная среда с эозин-метиленовым синим сухая (среда Левина)» выпускается в полиэтиленовых банках по 150, 200, 250 г, с инструкцией по применению, паспорт (в комплекте поставки). Ремонту и обслуживанию не подлежит.
Чувствительность среды, скорость роста и стабильность основных биологических свойств микроорганизмов. Набор реагентов «Питательная среда с эозин-метиленовым синим сухая (среда Левина)» должен обеспечивать на всех засеянных чашках рост тест-штаммов Shigella flexneri la 8516 и Escherichia coli 168/59 (0111:K58) при посеве по 0,1 мл микробной взвеси из разведений 10'7 и 10"6 через 18-20 ч инкубации и тест-штамма Staphylococcus aureus 209-Р при посеве по 0,1 мл микробной взвеси из разведения 10'5 не позднее 72 ч инкубации при температуре (37±1) °С.
Колонии S.flexneri la 8516 должны быть бесцветными прозрачными круглыми диаметром 1,0- 2,0 мм. Колонии E.coli 168/59 (0111:К58) - темно-фиолетовые с металлическим блеском (возможна слабая выраженность металлического блеска) диаметром 1,5-2,5 мм. Колонии S.aureus 209-Р - круглые, бесцветные или розоватого цвета диаметром до 1 мм.
Дифференцирующие свойства среды. Питательная среда Левина должна обеспечивать четкую дифференциацию по цвету колоний тест-штамма S. flexneri la 8516 от Е. coli 168/59 (0111:К58) при посеве по 0,1 мл микробной смеси указанных тест-штаммов из разведения 10"6 через 18-20 ч инкубации при температуре (37±1) °С.
Потенциальный риск применения изделия - класс 1.
При работе необходимо соблюдать правила техники безопасности в соответствии с ГОСТ Р 52905-2007 «Лаборатории медицинские. Требования безопасности», СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней»; СП 1.3.2518-09 «Дополнения и изменения № 1 к СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III - IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней; СП 1.3.2885-11 «Дополнения и изменения № 2 к СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III - IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней».
Соблюдение «Правил устройства, техники безопасности производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения» (Москва, 1981 г).
Утилизация изделий, пришедших в негодность, с истекшим сроком годности и изделий после контакта с биологическими образцами осуществляется в соответствии с требованиями СанПиН 2.1.7.2790-10 «Санитарно-эпидемиологические требования к обращению с медицинскими отходами».
Объекты исследований в санитарной и клинической микробиологии.
Подготовка питательной среды для использования.
50 г среды Левина размешивают в 1 л дистиллированной воды, кипятят 3 мин до полного расплавления агара, фильтруют через ватный фильтр разливают в стерильные бутылки и стерилизуют автоклавированием в течение 20 мин при температуре 112 °С. Среду после стерилизации охлаждают до температуры 45-50 °С, разливают по 20 мл в стерильные чашки Петри слоем 3-4 мм.
После застывания среды, соблюдая правила асептики, чашки подсушивают в течение 40-60 мин при температуре (37±1) °С. Готовая среда может быть использована в течение 7 сут при условии хранения при температуре 2-8 °С.
Посев исследуемого материала проводить согласно «Методическим указаниям по микробиологической диагностике заболеваний, вызываемых энтеробактериями» (М.,1984 г) и приказом Минздрава СССР от 22.04.85 № 535 «Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследований, применяемых в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений».
Регистрацию результатов анализа проводят визуально, по наличию роста колоний.
Учет результатов производят согласно «Методическим указаниям по микробиологической диагностике заболеваний, вызываемых энтеробактериями» (М., 1984 г) и приказом Минздрава СССР от 22.04.85 № 535 «Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследований, применяемых в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений».
Набор реагентов «Питательная среда с эозин-метиленовым синим сухая (среда Левина)» необходимо хранить в герметично закрытой упаковке в сухом, защищенном от света месте при температуре от 2 до 25 °С.
Транспортирование должно проводиться при температуре от 2 до 25 °С всеми видами крытого транспорта.
Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение настоящей Инструкции по применению.
